本研究利用两项已结束的随机对照临床研究样本，以拉米夫定耐药（LAMR）突变位点—rtM204I/V作为标记，以rtM204I/V耐药株相对于野毒株的比例变化，推测cccDNA池的更新周期。首先，从患者肝组织中特异性地提取和扩增HBV rcDNA、cccDNA和HBV RNA，从对应时间点的血清中提取和扩增HBV DNA和HBV RNA并进行测序分析。在配对的肝脏和血清样本中，cccDNA的LAMR构成比例与血清和肝内HBV RNA的LAMR构成比例有很强的相关性(r分别为0.96和0.90)，这表明当无法实施肝活检时，血清HBV RNA可以作为替代cccDNA的指标。进一步的研究发现，在接受替比夫定治疗且发生病毒学突破的患者中，血清HBV RNA LAMR突变比例从0增加至40%~90%所需要的时间为16~28周。类似地，拉米夫定耐药患者转换到干扰素治疗后，血清HBV RNA LAMR突变的比例从100%全部恢复为野生型的时间为24~48周。
总之，本研究通过监测血清HBV RNA LAMR突变比例的变化，推测出cccDNA的更新周期仅需数月，颠覆了过去一直认为cccDNA更新周期需要数年的观念。这将极大的增强我们对于乙肝治愈的信心，未来通过多靶点联合治疗的策略，彻底阻断cccDNA的补充，原有cccDNA池有望在数月内被清除，从而实现有限疗程治愈乙肝。
摘译自HUANG Q, ZHOU B, CAI D, et al. Rapid turnover of hepatitis B virus covalently closed circular dna indicated by monitoring emergence and reversion of signature-mutation in treated chronic hepatitis B patients[J]. Hepatology, 2021, 73(1): 41-52. DOI: 10.1002/hep.31240.
（南方医科大学南方医院感染内科 陆星宇 周彬 孙剑 报道）
