日前，浙江省舟山警备区医院外科、舟山市妇幼保健院妇产科共同发表论文，旨在建立肝癌顺铂耐药细胞系,探讨Wnt/β-catenin信号通路在肝癌顺铂耐药中的作用。研究指出，顺铂耐药细胞HepG-2/DDP出现了Wnt/β-catenin信号通路的激活，SiRNA干扰β-catenin基因表达可显著提高顺铂耐药细胞HepG-2/DDP对顺铂的敏感性，为克服肝癌顺铂新靶点的寻找提供了理论依据。该文章发表在2012年第28卷第12期《中国综合临床》上。
使用顺铂逐步增加剂量法诱导人肝癌HepG-2细胞，以建立其多药耐药细胞株HepG-2/DDP；MTT细胞毒实验检测顺铂对HepG-2和HepG-2/DDP细胞的生长抑制作用；荧光定量-PCR检测β-catenin 基因的表达；基因转染双链SiRNA干扰β-catenin基因的表达；Western blot实验检测目的蛋白的表达改变。
结果显示，成功建立了人肝癌HepG-2顺铂耐药细胞株；MTT细胞毒实验结果显示顺铂对HepG-2和HepG-2/DDP细胞的IC50值分别为(2.29±0.14)μmol/L和(20.51±0.84)μmol/L(t=95.68，P＜0.01)，与HepG-2细胞比较,HepG-2/DDP细胞对顺铂耐药8.96倍。荧光定量PCR结果显示：HepG-2和HepG-2/DDP细胞中β-catenin基因表达的2-△Ct值分别为0.323±0.065和0.674±0.097(P＜0.01)，Western blot检测也显示β-catenin蛋白的表达在HepG-2/DDP细胞也显著高于HepG-2细胞。化学合成的靶向SiRNA可以显著下调β-catenin的表达，顺铂对照组、SiRNA靶向干扰组、SiRNA阴性干扰组HepG-2/DDP细胞的IC50值分别为(21.02±1.64)、(6.23±0.68)、(20.44±1.26)μmol/L，对照组和SiRNA靶向干扰组之间差异有统计学意义(P＜0.01)。
