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摘要: 使甲型肝炎病毒基因组cDNA能够在减毒伤寒杆菌中表达,从而通过口服此种减毒伤寒杆菌达到对甲肝免疫的作用。将甲肝病毒编码区cDNA插入高效表达质粒PBV221,转化大肠杆菌DH5α,筛选并鉴定阳性克隆。将阳性克隆用电转移法转化减毒的伤寒杆菌BRD509。用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达。通过Western Blot和ELISA检测表明,表达蛋白可与人抗甲肝IgG发生特异性反应。用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠,小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体。结论:甲肝病毒cDNA可以在减毒伤寒杆菌中表达,且表达的蛋白质在体内、外有免疫原性。
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