中文English
ISSN 1001-5256
CN 22-1108/R

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

调控型表达丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶转基因小鼠的建立

孙梦宁 兰海云 马玉 赵亚 吕欣 杨敬 雷迎峰 姚敏 康健 招明高 汪爱勤 尹文

孙梦宁, 兰海云, 马玉, 赵亚, 吕欣, 杨敬, 雷迎峰, 姚敏, 康健, 招明高, 汪爱勤, 尹文. 调控型表达丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶转基因小鼠的建立[J]. 临床肝胆病杂志, 2011, 27(1): 76-80.
引用本文: 孙梦宁, 兰海云, 马玉, 赵亚, 吕欣, 杨敬, 雷迎峰, 姚敏, 康健, 招明高, 汪爱勤, 尹文. 调控型表达丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶转基因小鼠的建立[J]. 临床肝胆病杂志, 2011, 27(1): 76-80.
Sun MengNing, Lan HaiYun, Ma Yu, Zhao Ya, Lu: Xin, Yang Jing, Lei YingFeng, Yao Min, Kang Jian, Zhao MingGao, Wang AiQin, Yin Wen. Generation of conditionally controlled transgenic mice expressing hepatitis C virus NS3/4A protease[J]. J Clin Hepatol, 2011, 27(1): 76-80.
Citation: Sun MengNing, Lan HaiYun, Ma Yu, Zhao Ya, Lu: Xin, Yang Jing, Lei YingFeng, Yao Min, Kang Jian, Zhao MingGao, Wang AiQin, Yin Wen. Generation of conditionally controlled transgenic mice expressing hepatitis C virus NS3/4A protease[J]. J Clin Hepatol, 2011, 27(1): 76-80.

调控型表达丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶转基因小鼠的建立

详细信息
  • 中图分类号: R-332

Generation of conditionally controlled transgenic mice expressing hepatitis C virus NS3/4A protease

  • 摘要:

    目的建立调控因素存在下表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A丝氨酸蛋白酶的转基因小鼠。方法采用分子克隆技术构建可受Tet-On调控系统和Cre-LoxP基因敲除系统双重调控表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的真核表达质粒PBI-Ⅲ/LoxP-Luc-PolyA-LoxP-NS3/4A。该重组质粒线性化后,经显微注射制备转基因小鼠。首建鼠及经PCR检测阳性的子代鼠与C57BL/6小鼠交配传代。选择部分F2鼠与已经稳定建系的转基因小鼠Lap杂交,利用在体生物发光成像系统(BLI)检测肝脏稳定表达荧光素酶(Luc)报告基因的经盐酸强力霉素(Dox)诱导的双转基因子代鼠,并选择性针对稳定表达系传代扩群。结果酶切鉴定和测序分析显示重组载体构建成功。经PCR检测得到6只转基因首建鼠,其中3只可繁殖传代并持续检测到阳性子代鼠。BLI结果显示,由其中1只首建鼠传代而来的不同F2鼠与Lap鼠杂交得到的部分双转基因鼠肝脏部位发光信号强烈,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达。结论建立了转基因小鼠NS3/4A,并筛选到调控因素存在时转入外源基因特异稳定表达的转基因小鼠,为进一步建立严格调控型表达...

     

  • [1]Thompson AJ,McHutchison JG.Investigational agentsfor chronic hepatitis C[J].Aliment Pharmacol Ther,2009,29(7):689-705.
    [2]Lange CM,Sarrazin C,Zeuzem S.Specifically targetedanti-viral therapy for hepatitis C-a new era intherapy[J].Aliment Pharmacol Ther,2010,32(1):14-28.
    [3]Foy E,Li K,Sumpter R,et al.Regulation of interferonregulatory factor-3 by the hepatitis C virus serine protease[J].Science,2003,300(5622):1145-1148.
    [4]Seth RB,Sun L,Chen ZJ.Antiviral innate immunitypathways[J].Cell Res,2006,16(2):141-147.
    [5]Hiscott J,Lacoste J,Lin R.Recruitment of an interferonmolecular signaling complex to the mitochondrialmembrane:disruption by hepatitis C virus NS3-4Aprotease[J].Biochem Pharmacol,2006,72(11):1477-1484.
    [6]Dothager RS,Flentie K,Moss B,et al.Advances inbioluminescence imaging of live animal models[J].CurrOpin Biotechnol,2009,20(1):45-53.
    [7]Prescher JA,Contag CH.Guided by the light:visualizing biomolecular processes in living animals withbioluminescence[J].Curr Opin Chem Biol,2010,14(1):80-89.
    [8]Luker KE,Luker GD.Applications of bioluminescenceimaging to antiviral research and therapy:multipleluciferase enzymes and quantitation[J].Antiviral Res,2008,78(3):179-187.
    [9]Katinka MD,Bourgain FM.Mechanism of chromosomalintegration of transgenes in microinjected mouseeggs:sequence analysis of genome-transgene andtransgene-transgene junctions at two loci[J].EMBO J,1992,11(2):725-732.
    [10]McFarlane M,Wilson JB.A model for the mechanismof precise integration of a microinjected transgene[J].Transgenic Res,1996,5(3):171-177.
    [11]Bishop JO,Smith P.Mechanism of chromosomalintegration of microinjected DNA[J].Mol Biol Med,1989,6(4):283-298.
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  53
  • HTML全文浏览量:  11
  • PDF下载量:  114
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 出版日期:  2011-01-20
  • 分享
  • 用微信扫码二维码

    分享至好友和朋友圈

目录

    /

    返回文章
    返回